Practica Laboratorio De Cultivos Invitro

Politécnico Jaime isaza cadaivd.

Nos hicieron el acompañamiento las ingenieras agrónomas:

Mónica obregón instructora Sena

Mónica Gómez instructora Sena

1. Se hizo reconocimiento del laboratorio

2.materiales utilizados: elemeyer ,Becker ,tubo de ensayo, probeta ,pipeta ,mechera, gotero ,caja de peltre ,embudo, mortero ,frasco lavador ,atomizador ,corta objetos, frascos,espátula,cuchillo,pinzas,bisturí,tijeras,marcador,asas,cepillos lavadores

3. Insumos: gasa, hipoclorito, agua estéril, algodón, alcohol al 70%, alcohol al 95%, papel aluminio, papel vinilpel, cinta indicadora, papel periódico, cinta cristapel

Agar: extracto de algas marinas en 28grs por litro de H2

4. Equipos: plancha, autoclave, balanza eléctrica, licuadora, peachimetro, nevera, macroscópico, microscopio, cámara de flujo laminar,

Glucosa es un azúcar que es utilizado por los tejidos como forma de energía al combinarlo con el oxígeno de la respiración.

Hormonas vegetales: regaludaroras del crecimiento

Auxinas: son un grupo de fitohormonas que funcionan como reguladoras del crecimiento vegetal.

Acido gibe lico: Este ácido estimula a las células de las semillas germinantes a producir moléculas de ARN mensajero (ARNm) que codifican las enzimas hidrolíticas.

Macro nutrientes: se consideran minerales a los que están presentes en el tejido por encima del 0.1%, y son: N, S, P, K, Ca y Mg.

Micronutrientes: se refiere a las vitaminas y minerales que se encuentran por debajo del 0.1%

PROCEDIMIENTO.

Se toma un rizoma pequeño se esteriliza, luego se procede a cortarlo biselada mente teniendo la precaución de no cortar el punto de crecimiento para no atrofiar su desarrollo, luego de llegar al punto de crecimiento se esteriliza y se lleva a la cámara de flujo para proceder a aplicarle agar y la glucosa estando ya totalmente esterilizado se introduce o se guarda en un frasco de vidrio tapándose con un pedazo de papel aluminio y la cinta cristapel.
Al cabo de 4 semanas se obtiene una yema y crece un brote,
En la fase de proliferación intentamos obtener gran cantidad de brotes.
Sacamos micro estaquillas del primer brote, haciendo su cultivo cada 6-8 semanas hasta llenar el vidrio.
Al aumentar la concentración de auxinas se obtienen plantas enraizadas.
Puede hacerse de forma industrial y la fase de enraizamiento se hace en vivo.

INTEGRANTES:

Jose Ivan Cardona

Wilinton Mena Moreno

Henklin Renteria

INFORME DE LABORATORIO CULTIVO INVITRO

INTRODUCCIÓN

El cultivo de tejidos vegetales o cultivo in vitro de tejidos vegetales, es una técnica de reproducción en condiciones totalmente asépticas, en la que a partir de un pequeño segmento inicial de tejido es posible regenerar en poco tiempo miles o millones de plantas genéticamente iguales a la planta madre, cuando a este tejido le es aplicado un estímulo por medio de variables físicas y químicas controladas en un medio de cultivo.A diferencia de las técnicas tradicionales de cultivo, esta poderosa herramienta permite la propagación de grandes volúmenes de plantas en menor tiempo; así como el manejo de las mismas en espacios reducidos. Por otro lado, la técnica es de gran utilidad en la obtención de plantas libres de patógenos; plantas homocigotas, en la producción de plantas en peligro de extinción, en estudios de ingeniería genética, etc. El enorme potencial que posee esta metodología ha propiciado que en los últimos 25 años se haya incrementado el número de laboratorios de

cultivo de tejidos en el país para la producción comercial de plantas ornamentales y frutales al lo que ha motivado que algunos floricultores la estén utilizando como una alternativa viable en sus programas de producción.

OBJETIVOS

1. Conocer los equipos de laboratorio de cultivos invitro


2. conocer la importancia de los diferentes tipos de propagacion en un laboratorio invitro


3. conocer cuales son las caracteristicas de las plantas monocotideloneas y dicotiledoneas


4. aprender mediante una practica en laboratorio como se propagan las plantas a traves de un tejido meristematico

EQUIPOS DE LABORATORIO
Balanza electronica

este equipo sirve para medir cantidades exactas de peso.

Autoclave

es un equipo electrico donde se esterilizar los medios de cultivo este conta de un manonetro que mide la temperstura de 0-133 grados centigrados.

Nevera

es el sitio de almacenamiento para conservar lostejidos.

Camara de flujo laminar

Una cámara de flujo laminar es un receptáculo en forma generalmente prismática con una única cara libre (la frontal) que da acceso al interior, donde se localiza la superficie de trabajo. La esterilidad de la zona de trabajo se consigue porque se hace circular a través del interior de la cámara una corriente de aire que previamente ha sido microfiltrada para eliminar toda partícula extraña. Para evitar que el aire del exterior pueda entrar en la cámara de flujo sin pasar previamente por los filtros se procura que la presión interior sea ligeramente superior a la presion exterior, con lo cual el aire siempre circula de dentro hacia fuera y nunca al revés.
Según el grado de sofisticación de la cámara

Microscopio.
El microscopio es un instrumento que permite observar objetos que son demasiado pequeños para ser vistos a simple vista.

Estereoscopio
Los estereoscopios permiten hacer estudios de objetos y especímenes demasiado pequeños para ser estudiados a simple vista, pero demasiado grandes para ser estudiados bajo el microscopio compuesto. Su magnificación va desde cerca de 5x hasta más de 60x. Los estereoscopios también son conocidos como microscopios de disección, pues en muchas ocasiones son usados para disecar los especímenes o muestras, separando de ellos aquellas partes que serán examinadas mediante otros tipos de microscopía.

licuadora

se utiliza para licuar extractos vegetales para controlar plagas.

Peachimetro.

E s el que mide con exactitud el potencial de hidrogenizacion .

. BEACKER O VASOS PRECIPITADOS: Es un elemento de vidrio, este instrumento no sirve para medir volúmenes exactos, este se puede calentar sin ningún problema, pues su material resiste altas temperaturas

EMBUDO: Es un utensilio que permite filtrar sustancias.

MORTELO: Es un elemento de porcelana sirve para poder machacar un objeto del que debamos extraer algún tipo de sustancias: como por ejemplo para machacar las hojas y poder sacar así, parte de las sustancias que lo componen.

TUBO DE ENSAYO: Es un elemento de vidrio, de estos si se pueden calentar existen dos tipos de tubos, el primero es el utilizado en la centrifuga, y el segundo sirve parta obtener gases ya que este posee una saliente alargada en la parte superior del tubo, por debajo de la boca del tubo.
RECOMENDACIONES DE USO:

MECHERO BUNSEN: este mechero de gas que debe su nombre al químico alemán ROBERT W. BUNSEN proporciona una llama caliente (de hasta 1500 grados centígrados), constante y sin humo, por lo que se utiliza mucho en los laboratorios. Este formado por un tubo vertical metálico, con una base, cerca de la cual tiene la entrada de gas, el tubo también presenta un orificio para la entrada de aire que se regula mediante un anillo que gira. Al encender el mechero hay que mantener la entrada del aire cerrada; después se va abriendo poco a poco. Para apagar el mechero se cierra el gas.

GOTERO: Son de color blanco o ámbar. Sirven para guardar de una manera segura los reactivos, regularmente se administra con conteo de gotas. GOTERO: Consiste en un pequeño tubo de vidrio y en uno de sus extremos tiene un capuchón de hule, que permite succionar o arrojar las soluciones. Es realmente sencillo su uso, aunque en ocasiones, debido a que no se tiene presente algunas advertencias, se llegan a perder la mezcla de los líquidos. De suerte que debe mantenerse siempre limpio el gotero; por tanto, hay que lavarlo después de cada manipulación.

PROBETA: Instrumento de laboratorio que se utiliza, sobre todo en análisis químico, para contener o medir volúmenes de líquidos de una forma aproximada, es un recipiente cilíndrico de vidrio con una base ancha, que generalmente lleva en la parte superior un pico para verter el liquido con mayor facilidad

ERLENMEYER CON DESPRENDIMIENTO NATURAL: Es de vidrio y es de pared gruesa, con una tubuladura lateral. En la boca se acopla, mediante un corcho agujereado el butchner, y a la tubuladura, mediante una goma, la trompa de agua (o trompa de vacío). De esta forma se consigue filtrar sustancias pastosas.

. CAJA DE PETRI: Es la que se utiliza para hacer cultivos de virus y bacterias

.ESPATULA: sirve para poder recoger los residuos de las sustancias que se quedan adheridas en algún lugar.

Punta de asas

sirve para traspasar un hongo de un sitio a otro.

Jeringas

sirve para inyectar insectos

Cepillos lavadores

sirven para lavar vidriera especial

INSUMOS

Es un bien consumido en laboratorio se utiliza alcohol de 70 grados para desinfectar y alcohol de 95 grados para combustible del mechero.

PROCEDIMIENTO PARA REALIZAR UN CORTE DE MERISTEMO

1. El meristemo se debe lavar con agua esteril


2. se debe preparar una sustancia en un beaker con alchol de 70 grados por 30 min.


3. hipoclorito de sodio al 10% por 10 min


4. hipoclorito de sodio al 2.6% por 5 min.


5. hipoclorito de sodio al 1% por 1 min


6. hipoclorito de sodio 0.6% por 30 seg.

Los cortes sehacenen cuatro para centrarnos e el punto de crecimiiento.se coloca la muestra en el respectivo desinfectante y a medida que se se corte se realizan en todos los desinfectantes.luego se lleva al area de camara de flujo lsminar que es donde se siembra la respectiva muestra.se tapa con papel aluminio se coloca el cristapel y se sella hermeticamente y sel e coloca la respectiva identificacion.se deja por un periodo de tres a cuatro meses donde la planta alcanzara una altura del frasco.

Otra formas de propagacion se realizan por el polen ,flor ,el cormo, las yemas ,hojas ,raices, semillas etc.

Las semejanzas entre plantas Mono y Dicotiledóneas es que ambas son plantas vasculares, cormófitas, espermatófitas, traqueofitas o Fanerógamas de tipo Angiospermas, vasculares por la presencia de vasos de conducción representados por el Xilema o vasos leñosos o ascendentes por donde circula la Savia bruta y el Floema o vasos cribosos o descendentes por donde circula la Savia Elaborada, Cormófitas porque su Cormo o cuerpo vegetativo está diferenciado en Raíz, Tallo y Hojas, Espermatófitas porque son plantas que se reproducen sexualemnet por medio de Semillas, Traqueofitas porque presentas tráqueas o vasos de conducción, Fanerógamas porque son plantas con flores visibles ddntro de la flor se encuentran los sistemas reproductiovos( el Androceo, masculino destinados a la producción de los granos de Pólen que contienene a los Anterozoides o células reproductoras masculinas y el Gineceo sistema reproductor femenino destrinado a la producción de los óvulos o Primordios seminales o célula reproductora femenina). Las Monocotiledóneas y Dicotiledóneas son plasntas Fanerógamas que pertenecen a la Clase Angiospermas( angios= cubierto, spermio= semilla) , es decir, sus óvulos están protegidos por el ovario de la flor.Las Monocotiledóneas se caracte rizan por lo siguiente:- Semillas porvistas por un solo Cotiledón.- Raíz de aspecto Fibroso, fasciculado o en forma de cabellera( según su forma) y según su orígen Adventicio.- Tallo herbáceo o Semileñoso poco ramificado.- Hojas alargadas y sésiles ( sin pecíolo) y con nervadura Paralelinervada o Curvinervadas.- Flores con ciclos florales de 3 o 6 piezas, los ciclos protectores ( cáliz- corola) no están diferenciados y constituyen un Perigonio que puede ser Calicoide( con leve predominio del cáliz) o Perigonio Coroloide( con leve predominio de la corola).- Ejemplos: cebolla, maíz, cereales, gladiolo, etc.Las plantas Dicotiledóneas se caracterizan por lo siguiente:- Semillas provistas por 2 Cotiledones.- Tallo herbáceo, Semileñoso o Leñoso, con ramificación Simpodial, en algunos casos algunos tallos se adaptan para acumular sustancias de reserva como en los tubérculos.- Raíz de aspecto Típico y de orígen Normal o radicular ya que se origina de la radícuila del embrión y persiste dando orígen a una raíz p´rincipal y a raíces secundarias que no llegan a tener el predominio o la longitus de la raíz principal.- Hojas Simples o Compuestas, casi siempre Pecioladas y con Nervadura Retinervadas o Reticuladas.- Flores con ciclos florales de 4 a 5 piezas, los ciclos protectores se diferencian como Cáliz ( gamosépala o Dialisépala) y Corola ( gamopétala o Diapétala) y forman un Perianto.- Ejemplos: Ceibo, palo borracho, poroto, algarrobo,

CONCLUSIÓN
El cultivo in Vitro es un método muy importante, porque supone muchas ventajas a la hora de cultivar y del que se obtienen numerosos beneficios en un corto periodo de tiempo. Permite a su vez, una mejor manipulación de plantas u otros organismos en pequeños espacios.y las plantas van a ser mas resistentes a plagas y enfermedades.

INTEGRANTES.

WILLIAM FABRA

NANCY GARCES